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巴氏染色液染色步驟

更新時(shí)間:2016-08-18瀏覽:1472次

 本文內(nèi)容為您介紹產(chǎn)品的核心知識(shí).巴氏染色液為了防止細(xì)胞污染,凡是使用過(guò)的固定液,必須過(guò)濾后才能再使用。使用過(guò)長(zhǎng)的固定液,必須用酒精相對(duì)密度計(jì)測(cè)定,酒精濃度低于90%時(shí)應(yīng)該及時(shí)更換新液。濕固定的重要性:標(biāo)本再新鮮時(shí)及時(shí)固定時(shí)保證染色效果的重要因素。如蘇木素對(duì)細(xì)胞核的染色,巴氏染色中胞漿的特殊著色作用,均可因標(biāo)本干燥后固定而大受影響。制片標(biāo)本的郵寄:標(biāo)本再固定15min后取出,立即加甘油數(shù)滴于制片上,裝入密封的小盒中。實(shí)驗(yàn)室在收到標(biāo)本后,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再進(jìn)行染色。
  巴氏染色液染色的zui后一步是透明,使細(xì)胞的色度與細(xì)胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與制片封固之間的一項(xiàng)重要步驟。zui常用的透明溶劑使二甲苯,二甲苯的折射率在1.494,載玻片的折射率在1.515,兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現(xiàn)顏色或變得渾濁,一定要更換新液.巴氏染色操作流程 95%乙醇固定(15min)→清水沖洗多次→蘇木素染液(3-5min)→清水沖洗三次→藍(lán)化→95%乙醇漂洗→橙黃染液(1-10s)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50(3-5m)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無(wú)水乙醇漂洗→無(wú)水乙醇(2min)→二甲苯(2min)→中性樹(shù)膠封片。
  巴氏染色液對(duì)于不同的標(biāo)本需要不同的固定方法。zui為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細(xì)胞內(nèi)的酶捋蛋白質(zhì)分解而自容,并凝固細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、脂肪和糖類(lèi)等,使其保持與組織生活相仿的成分,從而使細(xì)胞各部分,尤其核染色質(zhì)易于著色。對(duì)于巴氏染色來(lái)說(shuō),酒精固定zui為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳,可造成細(xì)胞的人為變化,并可導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性的診斷。更多相關(guān)知識(shí),請(qǐng)咨詢(xún)本公司.

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