巴氏染色液封固制片,封固制片對(duì)于避免空氣干燥的影響,制片經(jīng)長期存放不褪色是非常重要的。一般使用24mm×50mm或24mm×60mm的蓋玻片,用二甲苯調(diào)配的中性樹膠進(jìn)行封固。
巴氏染色液透明,染色的zui后一步是透明,使細(xì)胞的色度與細(xì)胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與制片封固之間的一項(xiàng)重要步驟。zui常用的透明溶劑使二甲苯,二甲苯的折射率在1.494,載玻片的折射率在1.515,兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現(xiàn)顏色或變得渾濁,一定要更換新液。 巴氏染色操作流程 95%乙醇固定(15min)→清水沖洗多次→蘇木素染液(3-5min)→清水沖洗三次→藍(lán)化→95%乙醇漂洗→橙黃染液(1-10s)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50(3-5m)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇(2min)→二甲苯(2min)→中性樹膠封片。
巴氏染色液胞漿染色,胞漿染色在巴氏方法中亦稱為OG—EA染色,它包括橘黃G(OG)和EA兩部分染色。由于橘黃G是一種小分子染料,能夠很快地作用于胞漿,一般染色時(shí)間不宜過長,通常1-2min。對(duì)于宮頸、陰道上皮中非正常角化細(xì)胞和角化型鱗癌細(xì)胞的胞漿中都可以出現(xiàn)鮮艷的橘黃色。先進(jìn)技術(shù),更好的領(lǐng)域.