巴氏染色液堿化堿化亦稱返藍(lán)過程,可以使用飽和碳酸鋰或3%氨水堿化,目的使蘇木素及早顯色,時(shí)間約數(shù)秒.更重要的是流水沖洗,可使藍(lán)色顯的更鮮艷.堿性溶液亦需要充分漂清才不會(huì)妨礙下一步的胞漿著色及標(biāo)本制成后的顏色保存.分化和堿化溶液至少每天更換新液.
巴氏染色液染色效果,上皮細(xì)胞,細(xì)胞核呈藍(lán)色,核仁呈紅色,底層、中層及表層網(wǎng)狀核細(xì)胞胞漿均染成藍(lán)綠色,表層固縮核細(xì)胞胞漿染成淡紅色或淡藍(lán)綠色.注意事項(xiàng),涂片厚薄適宜,固定后方可染色.冬季染色時(shí),如環(huán)境溫度較低時(shí),蘇木素、橙黃、伊紅的染色時(shí)間可適當(dāng)延長.固定液應(yīng)定期更換,以免固定不充分導(dǎo)致著色不佳.染色液應(yīng)定期更換,以免影響染色效果.
巴氏染色液在偏堿環(huán)境中,蛋白質(zhì)的羧基游離增多(帶負(fù)電),在偏酸環(huán)境中蛋白質(zhì)氨基游離增多(帶正電),磷鎢酸在染色過程中,不但作為媒染劑可增加染料的著色力,同時(shí)磷鎢酸與碳酸鋰還是一對(duì)弱酸弱堿,實(shí)際上是一對(duì)緩沖劑,可中和分化及藍(lán)化時(shí)可能留下的少量酸或堿,保證染色達(dá)到理想效果,其適用于上皮細(xì)胞及間皮組織的標(biāo)本,是陰道脫落細(xì)胞檢查中zui常用的染色方法,該染色法不但具有顯示細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰,分色明顯,透明度好,胞漿受色鮮艷等特點(diǎn).